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C 端移码突变产生可行的敲除突变体且三种必需蛋白激酶存在发育缺陷

导读 功能缺失突变体是基因功能研究的基础资源,近十余年来,CRISPR/Cas9基因组编辑技术已成为靶向基因敲除的常规遗传工具。然而,一些重要的基...

功能缺失突变体是基因功能研究的基础资源,近十余年来,CRISPR/Cas9基因组编辑技术已成为靶向基因敲除的常规遗传工具。然而,一些重要的基因很难产生可存活、可遗传的敲除突变体。蛋白激酶是 细胞内信号转导的基本组成部分,这些基因的缺失会导致植物严重的生长发育缺陷和不育。因此,获得这些基因的可遗传敲除突变体对于分析植物生长发育和抗逆免疫的信号网络具有重要意义。

在之前的研究中,作者发现敲除水稻丝裂原活化蛋白激酶 1 ( OsMPK1 ) 无法产生可存活和可遗传的突变体。此外,作者还报道了至少 20 个 RLK/RLCK 基因敲除突变体表现出发育缺陷,无法产生可存活的种子。

在本研究中,作者通过靶向胚致死基因OsMPK1的 C 末端序列成功获得了几个弱突变体。这些弱突变体表现出严重的发育缺陷和对稻瘟病菌的抗性增强,并产生了数十个遗传了突变的可存活种子。此外,作者还获得了细胞壁相关蛋白激酶(Os07g0493200)和富亮氨酸重复受体样蛋白激酶(Os01g0239700)的可存活和可遗传的突变体,而这些基因的无效突变是致命的。总之,这项工作表明在 C 末端序列附近引入移码突变可以降低这些蛋白激酶的活性,为基因功能研究提供了宝贵的资源,并促进了 控制水稻发育、免疫和非生物胁迫耐受性的信号网络中蛋白激酶活性的调控。

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