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研究表明提高EPO生产效率的方法

导读 对于许多人来说,EPO与掺杂和循环有关。但实际上,EPO是一种重要的医学药物。这种激素通过刺激红血球的生成在体内自然起作用。由例如慢性肾...

对于许多人来说,EPO与掺杂和循环有关。但实际上,EPO是一种重要的医学药物。这种激素通过刺激红血球的生成在体内自然起作用。由例如慢性肾脏疾病,艾滋病或血液系统疾病引起的贫血患者可以从EPO治疗中受益匪浅。此外,许多因接受化疗而贫血的癌症患者也非常需要EPO治疗。据估计,EPO疗法的市场每年约为110亿美元。

如今,医用EPO使用所谓的重组DNA技术在哺乳动物细胞系中生产,其中插入了人类基因以产生重组人EPO(rhEPO)。

然而,重组人激素如EPO可能难以有效产生,因为它们会被细胞自身的蛋白质和激素饮食酶迅速降解。

丹麦技术大学(DTU)诺和诺德基金会生物可持续性研究中心的研究人员使用CRISPR技术研究了如何减少几种细胞“应激源”以提高生产和产品质量。这项工作最近发表在《代谢工程》杂志上。

研究人员发现,通过敲除涉及糖基降解的三个基因和涉及程序性细胞死亡的两个基因,它们可以使中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的产量提高1.4倍。此外,质量大大提高。敲除细胞含有大约40%的最活跃EPO形式,而非敲除细胞仅含有大约2%的最活跃的EPO形式(高度唾液酸化的EPO)。高度唾液酸化的EPO形式很重要,因为它具有最长的半衰期。只有活跃的EPO才能治疗贫血,因此必须保持这一功能以保持低价格和高品质。

如何避免EPO降级

优化的细胞系实际上是设计用于所谓的分批补料培养的,这是在10-14天的过程中连续补料细胞的一种方式。补料分批接种是制造各种条件下的人体激素和治疗癌症的抗体的常用方法。

但是很难通过补料分批生产EPO,因为随着时间的流逝,它会被破坏。因此,即使这种方法效率较低,如今EPO仍以“单喂”方式(分批培养)生产。为了克服这些障碍进行分批补料培养,其他人尝试向混合物中添加补充剂以避免降解。但是,有了这一新的细胞系,就不需要解决方法了,诺和诺德基金会生物可持续性研究中心的博士后Tae Kwang Ha解释说:

“有了我们的细胞系,您无需添加任何东西-它就可以了。”

这些结果仅在小规模显示,因此需要扩大规模以查看电池在大型生产罐中的性能是否相同。但是这项研究证实,敲除特定基因肯定可以提高单细胞的生产力和产品质量。

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